Stres kerja merupakan sesuatu kondisi ketegangan yang menciptakan adanya ketidakseimbangan fisik dan psikis yang mempengaruhi emosi, proses berpikir, dan kondisi seorang karyawan. Stres dapat mengakibatkan gangguan fisik dan/atau mental, kadang manifestasinya tidak tampak namun bisa mempengaruhi kehidupan dan kesejahteraan pribadi selain produktivitas di tempat kerja. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui hubungan antara umur, masa kerja, dan beban kerja mental dengan stres kerja pada pegawai Puseksmas Cigugur Tengah Kota Cimahi. Jenis penelitian ini adalah penelitian observasi analitik dengan desain penelitian cross sectional. Sampel penelitian sebanyak 30 orang pegawai. Instrumen pengumpulan data yang digunakan dalam penelitian ini yaitu menggunakan kuisioner DASS 42 untuk stres kerja dan NASA-TLX dengan taraf signifikansi 0,05 untuk beban kerja mental. Analisis data dilakukan secara univariat dan bivariat dengan uji Chi-square. Hasil Penelitian menunjukkan bahwa terdapat hubungan antara umur (p-value 0,001 nilai PR = 0,039); masa kerja (p-value 0,002 nilai PR = 0,035); dan beban kerja mental (p-value 0,008 nilai PR = 13,200) dengan stres kerja. Disarankan hendaknya Puskesmas Cigugur Tengah untuk mengadakan pelatihan, melakukan latihan fisik dan mental seperti olahraga dan relaksasi bagi para pegawai. Kata Kunci : Stres Kerja, Umur, Masa Kerja, Beban Kerja Mental Kepustakaan : 29, 2017-2023